эмбрионы хорошего качества это какие

Оценка качества ооцитов и эмбрионов

Для успешного результата протокола ЭКО необходимо тщательно и хорошо контролировать все этапы процедуры. Одной из важных стадий является качественная оценка ооцитов (яйцеклеток) и оплодотворенных вне организма эмбрионов, выбранных для переноса в матку.

От результатов этого во многом зависит, насколько удачными будут попытки экстракорпорального оплодотворения и вынашивание долгожданной беременности.

Процесс скрининга яйцеклеток с целью отбора на ЭКО, чтобы использовать максимальные шансы на беременность, проводится до экстракорпорального оплодотворения. Оценка и отбор эмбрионов — после.

Что такое качество ооцита

Многих пациенток, проходящих протокол ЭКО, волнует вопрос, можно ли улучшить качество ооцитов. Ведь, хотя сперматозоид и вносит существенный вклад в формирование нового человека, судьба зародыша в основном определяется яйцеклеткой.

Для успешного оплодотворения она должна достичь определенной стадии зрелости, и только тогда будет способна взаимодействовать со сперматозоидом и создать после оплодотворения жизнеспособный здоровый эмбрион.

Влияет ли возраст женщины на качество яйцеклеток?

Яйцеклетки закладываются в яичниках девочки еще до ее рождения, потом на протяжении жизни новые не образуются, а лишь созревают в фолликулах в соответствии с женским репродуктивным циклом.

На то, каковы они будут влияет много факторов: возраст, образ жизни, уровень выработки гормонов и т.д.

Добиться улучшения качества репродуктивных клеток непросто, нужно сочетание медицинских методов и соблюдения ЗОЖ с ранних лет.

Молодые женщины обладают яйцеклетками достаточно хорошего качества для зачатия и рождения детей. Но возраст влияет на репродуктивный потенциал отрицательно, после 35 лет половые клетки могут постепенно утрачивать морфологические признаки зрелости, необходимые для формирования полноценного плода.

В этом случае мы улучшаем ожидаемый результат проведением соответствующей гормональной терапии (стимуляции).

При процедуре ЭКО до взятия яйцеклеток с помощью пункции проводится стимулирующая гормональная терапия, нацеленная на ускоренное созревание яйцеклеток и позволяющая улучшить их показатели.

Роль и работа яйцеклетки

Яйцеклетка созревает в фолликуле яичника, это самая крупная отдельная клетка организма.

Фолликул — особая структура, которая отвечает за питание и регуляцию созревания яйцеклетки.

Последовательные ядерные и цитоплазматические изменения по мере роста фолликулов — как при естественном, так и при стимулированном цикле — очень важны, в ходе их синтезируются и аккумулируются необходимые для развития плода соединения.

Яйцеклетки окружены защитной гликопротеиновой, т.н. блестящей оболочкой (при микроскопии заметно, как она преломляет свет).

Зрелый, он покрыт фолликулярным эпителием (кумулюсом), образуя ооцит-кумулюсный комплекс (ООК).

Яйцеклетка — клетка с уникальной высокоспециализированной дифференциацией, от нее зависит:

Как проверяют качество ооцита?

Все данные по оценке яйцеклеток и оплодотворенных зародышей вносятся в эмбриологический протокол – документ, последовательно фиксирующий все показатели при любой процедуре ЭКО.

Приемлемость женской репродуктивной клетки — понятие многофакторное и включает ряд характеристик.

В клинической практике ооциты, точнее ооцит-кумулюсные комплексы (ООК), оценивают по критериям:

Именно от этих параметров зависит последующее благополучное развитие оплодотворенного зародыша.

Начальный скрининг ооцитов проводится врачом-эмбриологом с помощью визуального наблюдения в бинокулярный микроскоп с помощью стандартного света или микроскопии в поляризованном свете непосредственно после получения ООК методом трансвагинальной пункции преовуляторных фолликулов яичника.

В ходе проверки качества женских репродуктивных клеток, их оценивают по визуальному виду таких структур:

О качестве свидетельствует однородность и единый цвет цитоплазмы, отсутствие гранул. В зрелых ооцитах заметно первое полярное тельце.

Об ее отсутствии – деформации, темный цвет, присутствие вакуолей и гранул.

В эмбриологическом протоколе ОКК, кумулюс которого визуально прозрачен, получает оценку «1-1», он содержит зрелый ооцит.

Окончательную оценку состояния проводят врачи после очистки ооцита перед проведением оплодотворения.

Наряду с качественными яйцеклетками возможно получение незрелых, дегенеративных и разрушенных.

В среднем, среди ооцитов в стимулированном цикле, большинство — готовы к оплодотворению, 5-20% — незрелые, при правильной терапии их статус можно повысить, 2-5% — дегенеративные, т.е. не пригодны.

Процент неподходящих клеток увеличивается в зависимости от возраста.

Оценка начального качества эмбрионов и на 2-3 день развития

Тщательная оценка результативности оплодотворения проводится регулярно в продолжение определенных промежутков времени с помощью выверенных методов анализа в лаборатории.

В течение суток, последующих за взятием преовуляторных яйцеклеток, которые считают первым днем развития эмбриона, врачи наблюдают первичную динамику прошедшего оплодотворения яйцеклетки.

Презигота и зигота

После соединения генетического материала донора спермы и яйцеклетки в лаборатории in vitro, путем ли их непосредственного слияния (ЭКО), или инъекционного внедрения генома сперматозоида в яйцеклетку (ИКСИ), спустя 16-18 ч. наблюдается стадия презиготы. которая представляет собой ооцит, в котором имеются женский и мужской пронуклеусы, но их генетический материал наблюдается по отдельности и еще не прошел слияние.

В организме (т.е. in vivo) эта стадия оплодотворения проходит в фаллопиевой (маточной) трубе.

Врач-эмбриолог в течение первых суток оценивает, насколько адекватно состоялся процесс оплодотворения.

В норме правильно прошедший его ооцит содержит 2 видимых пронуклеуса, прочие варианты являются аномальными отклонениями и исключаются из дальнейшего культивирования.

Зигота (оплодотворенная яйцеклетка) — эмбрион в первые сутки развития, пронуклеусы уже слились, и началось клеточное деление.

Фаза дробления отсчитывается от вторых суток эмбриогенеза (т.е. 2-3 день). Дроблением называют синхронное клеточное деление зиготы на одинаковые бластомеры, которые обладают тотипотентностью, т.е. имеют возможности дать начало любой клетке организма.

На стадии дробления пригодность зародыша для ЭКО оценивают по степени одинаковости бластомеров: чем более они равномерны, тем он адекватнее по критериям для имплантации.

Его оценка на этой стадии развития проводится по:

4-е сутки эмбрионального развития

В первые трое суток эмбриогенеза деление клеток идет бинарно — каждая из них надвое, используя энергию из запасов самой яйцеклетки.

Четвертые сутки – точка отсчета начала клеточной дифференциация, часть из них даст начало формированию зародыша, от прочих зависит обеспечение правильной имплантации его в эндометрий матки и формирование плаценты.

3-4 сутки от оплодотворения — время максимальной чувствительности к негативным воздействиям.

Морула

Зигота путем эмбрионального деления превращается в морулу.

На третьи-четвертые сутки происходит образование морулы, так называют эмбрион, состоящий из приблизительно 16-32 клеток (бластомеров), сферической формы.

Достигнув 16-клеточной стадии, морула дифференцируется:

В процессе бластомеры образуют компактную шарообразную структуру, межклеточные контакты укрепляются, внешняя поверхность морулы сглаживается, происходит компактизация.

Для оценки качества морулы используют критерий компактизации.

Оценка оплодотворения в стадии бластоцисты

В норме, период от завершения 4-х до середины 6-х суток развития эмбриона (в среднем, наиболее часто — 5-е сутки, очень редко на 7-е) происходит переход к формированию следующей стадии.

При переходе на нее в моруле образуется бластоцистозная полость — пространство, заполненное жидкостью. Когда она достигает 20% от объема морулы, последняя именуется бластоцистой.

Это наиболее сложно организованная стадия эмбриона, которая существует в лаборатории ЭКО вне тела матери (до имплантации в полость матки).

После стадии бластоцисты, прошедшие самый пристальный и строгий отбор полноценные эмбрионы будут имплантированы женщине.

В строении бластоцисты выделяют две клеточные группы:

На стадии бластоцисты оценить качественные характеристики эмбриона довольно непросто вследствие сложности его структуры.

Но все же основные критерии сводятся к:

Оценка кодифицируется буквенно-цифровым обозначением, где от 1 до 4 оценивается размер бластоцистозной полости, а латинскими литерами А — С характеризуется внутриклеточная масса (первая буква) и трофэктодерма (соответственно, вторая).

Также принимается во внимание стадия прохождения бластоцистой этапа «хетчинга» — разрыва ею окружающей эмбрион гладкой «блестящей» оболочки (в ходе естественного оплодотворения последняя облегчает прохождение бластоцисты по маточным трубам в полость матки и прикрепление):

При определении качества эмбриона более приоритетное значение имеет буквенная классификация, нежели цифровое обозначение размера бластоцистозной полости.

Поскольку эмбрионы обладают вариативными индивидуальными особенностями, и каждый может развиваться в разном темпе, поэтому любой показатель полости (число) лежит в границах нормы.

Показатели степени развития трофэктодермы и внутриклеточной массы:

Для примера, по приведенной классификации оценки качества эмбрионов по бластоцитам:

4АА является более предпочтительным, нежели 2ВВ.

Как улучшить шансы на успешное проведение ЭКО?

При отборе яйцеклеток для оплодотворения использовать имеющие максимальные оценки качества, а эмбрионы для подсадки в матку — те, у которых наивысшие буквенные показатели. Ориентироваться в них поможет приведенная информация данного сайта.

По принятому протоколу для проведения ЭКО при лечении бесплодия отбираются 1-3 эмбриона лучшего качества из оплодотворенных.

Скрининг приемлемости яйцеклеток позволяет провести отбраковку не надлежащего качества и дает право отобрать генетический материал, наиболее подходящий для ЭКО.

Если надлежащие эмбрионы были получены в большем количестве, то «запасные» экземпляры подвергаются криоконсервации («заморозке») в банке спермы, что повышает перспективы при неудачности предыдущих попыток.

Источник

СТРАТЕГИИ И МЕТОДЫ ВЫБОРА ЭМБРИОНА

Успех в программе экстракорпорального оплодотворения зависит от многих факторов и определяется сочетанием правильно подобранных методик на разных этапах цикла: стимуляции суперовуляции, трансвагинальной пункции, обработки эякулята или биоптата яичек, выбора подходящей процедуры оплодотворения ооцитов (ЭКО, ИКСИ, ПИКСИ,ИМСИ), переноса эмбриона/ов в полость матки, гормональной поддержки после переноса.

Очень важным моментом является выбор эмбриона/ов, который будет перенесен в полость матки. После процедуры экстракорпорального оплодотворения эмбриолог внимательно наблюдает за развитием эмбрионов, при этом оценивает развитие каждого из них индивидуально. Основными характеристиками являются наличие оплодотворения, темп развития и качество эмбрионов.

На основании информации о развитии эмбрионов, их количестве и состояния эндометрия, а также дальнейшей тактики лечения врач и эмбриолог принимают решение:

Рассмотрим основные подходы, применяющиеся для ответа на эти вопросы, в случае, если перенос все же состоится в данном лечебном цикле. Отмена переноса случается довольно часто и может быть связана с развитием у пациентки синдрома гиперстимуляции, необходимостью в проведении дополнительных генетических обследований эмбрионов, недостаточностью функционального состояния эндометрия и др.

По каким признакам выбирается эмбрион для переноса?

Традиционно качество эмбрионов и процесс их развития принято оценивать визуально: после оплодотворения ооцитов (это происходит в день пункции, его принято считать нулевым) эмбриолог при помощи микроскопа с высоким разрешением и специальным контрастом наблюдает за эмбрионами и классифицирует их в соответствии с принятой системой. Качество эмбриона оценивают по разным критериям в зависимости от суток развития.

К пятым суткам начинается процесс кавитации (в эмбрионе образуется полость, клетки делятся на две группы – трофобласт и внутреннюю клеточную массу в зависимости от их положения в эмбрионе и дальнейших функций), в результате на 5-6 сутки развития формируется бластоциста – эмбрион, готовый к имплантации в стенку матки.

Классификация, разработанная для бластоцист более сложная, чем для эмбрионов более ранних стадий, и сводится к оценке количества и качества клеток в различных частях бластоцисты, а также размеров полости (Рис.6). В целом такая система оценки эмбрионов по внешнему виду оправдывает себя, так как имеется корреляция между качеством переносимых эмбрионов и частотой наступления беременности. Тем не менее, выбор качественного эмбриона – сложная задача, и чем больше современных методик и средств анализа доступно эмбриологу в клинике, тем выше вероятность, что этот выбор будет наиболее точным.

С недавних пор у эмбриологов появилась возможность наблюдать за развитием эмбриона практически непрерывно, благодаря новой технологии time-lapse микроскопии. В инкубатор, где развиваются эмбрионы, помещается специальный прибор, который через определенные интервалы времени фотографирует эмбрионы и сохраняет изображения. В итоге эмбриолог получает своеобразный фильм о развитии каждого эмбриона.

Преимуществом этого подхода является то, что появляется возможность оценивать не только внешний вид эмбриона, но и динамику его клеточных делений и видоизменений во времени. Кроме того, для анализа развития эмбриона не нужно доставать его из инкубатора, что снижает стресс от резкой перемены внешних условий. Соотнеся полученную запись с имеющимися данными о нормальном временном ходе развития, эмбриолог может выбрать для переноса эмбрион не только с наилучшими внешними характеристиками, но и с наиболее оптимальной “историей” развития.

Если у пары есть показания, связанные с риском передачи наследственных заболеваний, либо повышенной вероятностью возникновения генетических аномалий при оплодотворении и развитии эмбрионов, необходимо проводить не только оценку качества (внешних характеристик) эмбрионов, но также анализ их генетического материала. В таких случаях кроме визуальной оценки проводят также преимплантационную генетическую диагностику (ПГД).

После проведения ПГД эмбриолог может выбрать для переноса в полость матки эмбрионы без генетических отклонений, что существенно увеличивает вероятность наступления беременности и снижает частоту невынашивания.

При первом обращении к врачу-репродуктологу супругам нужно будет подробно рассказать, были ли в роду у каждого из них наследственные заболевания. Однако даже если пара не знает о наличии у них генетических заболеваний, нужно провести ряд обследований (генетическая диагностика перед планированием беременности): кариотипирование и тест на носительство наиболее часто встречающихся моногенных заболеваний у обоих супругов.

По результатам этих тестов можно определить, показано ли паре проведение преимплантационной диагностики эмбрионов. Помимо этого важную роль играет возраст будущей матери – с возрастом (особенно после 36 лет) повышается вероятность рождения ребенка с хромосомными аномалиями. В каждом случае набор генетических аномалий, на которые будет проводиться тестирование эмбрионов, определяется для каждой пары индивидуально, в зависимости от показаний и наличия риска развития тех или иных генетических отклонений.

Сколько эмбрионов переносить?

Вопрос о выборе количества эмбрионов для переноса всегда является предметом детального обсуждения между репродуктологом, эмбриологом и пациентом. Ответ на этот вопрос в каждом конкретном случае зависит от количества имеющихся эмбрионов, стадии их развития (так, вероятность имплантации повышается при переносе бластоцисты по сравнению с дробящимся эмбрионом), оценкой риска имплантации двух и более эмбрионов.

При отсутствии единого решения для всех случаев, общемировой тенденцией является снижение количества единовременно переносимых в полость матки эмбрионов с целью снижения вероятности наступления многоплодной беременности.

На какой день переносить эмбрионы?

Важным решением является и то, на какой день осуществлять перенос эмбриона. Оно также требует тщательного анализа всех факторов. В том числе, важную роль здесь играют: количество и качество полученных эмбрионов, анамнез пары, информация о предыдущих попытках ЭКО/ИКСИ. Обычно перенос эмбрионов в полость матки проводится с 3 по 6 сутки развития.

По сравнению с более ранними стадиями, к 3-м суткам развития уже активируется собственный геном эмбриона, а значит – снижается вероятность остановки в развитии из-за ошибок в этом процессе. Кроме того, оценка эмбрионов на 3 и 5 сутки развития более удобна с точки зрения строения эмбриона, чем на 4-е сутки (стадия компактизации).

Не вдаваясь в детали, можно выделить следующие общие принципы, влияющие на выбор дня переноса эмбрионов:

Таким образом, перенос эмбриона в полость матки проводится только после принятия специалистами целого ряда тщательно взвешенных решений. Чем больше информации окажется в руках у репродуктологов и эмбриологов, тем более оптимальным будет выбор всех слагаемых, необходимых для успешного наступления беременности и рождения здорового ребенка.

Источник

Под микроскопом эмбриолога. Эмбриологический этап в процедуре ЭКО.

Кто такой эмбриолог
Знакомьтесь – эмбриологи. Редкие и уникальные кадры, биологи по образованию. Именно они работают над тем, чтобы «чудо» случилось – оплодотворение и зарождение эмбрионов. Это они оценивают качество эмбрионов и принимают решение: из какого эмбриона получится ваш малыш. Это высококвалифицированные специалисты, которые не только работают день и ночь, но и постоянно учатся, перенимая новые тенденции в науке.

Как развивается эмбрион
В первый день после пункции яйцеклетка превращается в зиготу. Возможно, многие помнят этот термин из школьной биологии. На этом этапе мы видим двойной набор хромосом – 23 хромосомы женщины и 23 хромосомы мужчины. Если образовались два шарика – пронуклеусы – значит, оплодотворение прошло хорошо.
После этого, ночью, происходит первое дробление клетки. Второе, утреннее дробление эмбриологи начинают активно наблюдать. На этот момент они уже видят четырехклеточный эмбрион. На третьи сутки – восьмиклеточный эмбрион. Все эти дни с эмбриона не сводят глаз. Ведь его поведение учитывается при оценке.
На четвертые сутки 10-16 клеток эмбриона сливаются воедино, образовалась морула. И вот, наконец-то, пятый день – бластоциста. Эмбрион, который готов к переносу. Ведь на пятый день он уже имеет сложную структуру, состоящую из 128 клеток. На этой стадии эмбрион обладает наибольшей способностью к имплантации, так как уже преодолел препятствия, возникающие на разных стадиях дробления.

Три или пять дней?
Мы культивируем эмбрионы пять дней. Это очень дорогое удовольствие: гигантская нагрузка на эмбриологическую службу, постоянная смена дорогостоящих сред. Задействовано много инкубаторов. Ведь моделируется маточная труба, она вырабатывает различные вещества, которые эмбриологи заменяют специальными средами.
Если в результате стимуляции у нас получилось много яйцеклеток, то эмбрион будет всегда переноситься на пятые сутки. Эмбриологи дают развиться эмбрионам, чтобы выбрать самого сильного. Ведь если эмбрион дожил до 5 дней в искусственной среде, вероятность того что он приживется в матке возрастает.

В тех случаях, когда было получено не много клеток, и созревает только один эмбрион – может быть принято решение о переносе на третий день. Так специалисты дают возможность эмбриону дозреть в матке, пытаясь всеми силами увеличить шансы на беременность.

Предпочтение отдается все-таки переносу на пятый день, потому что на пятый день остаются самые жизнеспособные эмбрионы. Слабые эмбрионы погибают между третьим и пятым днем.
Пять дней – это целая жизнь для эмбрионов, за этот период они постоянно меняются. На третий день он может казаться качественным, а к пятому дню все может кардинально измениться.
Благодаря системе, которая позволяет культивировать эмбрионы пять дней, в случае, если эмбрионы дожили до этого дня – у нас есть гарантии того, что это жизнеспособные эмбрионы.

Самое интересное. Как происходит отбор
Итак, как вы знаете, каждому эмбриону дают оценку. Существует несколько признанных классификаций эмбрионов. В Клинике Нуриевых используется классификация по Гарднеру. Что это такое? Например, возьмем самый лучший эмбрион. Эмбриологи шутливо называют такой эмбрион «отличник» – 5АА. Первая буква показывает качество внутриклеточной массы (ВКМ) – внутренний слой эмбриона, который дает начало плоду. Чем больше внутренняя масса, тем вероятнее – это А, если мельче – B, совсем мало – С.
Вторая буква – оценка внешнего слоя эмбриона – трофобласта. Цифра постоянно меняется, так как эмбрион растет. Цифру можно не писать, она не существенна при оценке.
Получились разные эмбрионы, всем присвоили разные буквы и цифры. Как же эмбриолог будет выбирать? 5АА – базовая система оценки, но она не дает полной информации для выбора эмбрионов.

«Репутация» эмбрионов
Иногда из двух эмбрионов с разными характеристиками, например, 5АА и 5АB, эмбриолог выбирает для пересадки второй эмбрион, с «неидеальными», казалось бы, показателями. Только на первый взгляд показатели «неидеальны», потому что не только качество двух оболочек определяет жизнеспособность эмбриона. Еще один важный критерий – репутация эмбриона. В нашем примере у эмбриона 5АВ она оказалась лучшей.
Репутация эмбриона складывается из множества факторов, полученных в процессе наблюдения за их «поведением» с 1 по 5 день жизни. Учитывается все: какой эмбрион развивался лучше, какой быстрее дробился, как вел себя на каждом этапе – все это в итоге влияет на судьбу эмбриона.
В любом случае, пациенту могут перенести эмбрионы любого класса. Да, эмбрион с показателями АС слабее, чем АА, но у каждого эмбриона, который дожил до пятого дня, всегда есть шанс на дальнейшую жизнь, и из каждого эмбриона может получиться ребенок. Эти показатели лишь первая видимая, но не единственная его характеристика. Окончательную верную оценку эмбриону может дать только специалист эмбриологической лабораторий. Поэтому делать преждевременные выводы, узнавая показатели своих эмбрионов, ни в коем случае нельзя.
Также надо отметить, что качество эмбриона не имеет прямой связи с шансами и исходами беременности. Каждый случай индивидуален.

Заморозка эмбрионов
В первом стимулированном протоколе мы выбираем самые лучшие эмбрионы и переносим их, – остальные эмбрионы замораживаются. Это позволит Вам получить следующую беременность с меньшими финансовыми затратами и без стимуляции в криопротоколе. Еще несколько лет назад после заморозки и разморозки исходы были хуже, чем в свежих протоколах. Сегодня доказано: свежие и замороженные эмбрионы, имеют абсолютно одинаковые шансы. Наука движется вперед и современные среды для заморозки идеальны, и обеспечивают выживаемость эмбрионов свыше 90 процентов.
В нашей Клинике заморозке подлежат только те эмбрионы, которые смогут ее пережить, и соответственно, дать начало беременности уже после разморозки.
У эмбриологов есть четкая сложная инструкция, по которой происходит отбор эмбрионов для заморозки. На решение влияет множество факторов: качество бластоцисты, репутация эмбриона, какой у женщины по счету протокол, какой диагноз и т.д. Принять правильное решение, о том, какой эмбрион замораживать может только эмбриолог.
Как замораживаются эмбрионы? Только методом витрификации. Витрификация – мгновенный способ заморозки, с добавлением специальных растворов – криопротекторов, которые исключают образование кристаллов льда, повреждающих клетки. Механические повреждения сводятся к нулю. Благодаря этому выживаемость эмбрионов составляет более 90 процентов. В нашей Клинике этот метод начал применятся с самой первой заморозки и используется по сегодняшний день.

Вы – наш пациент, и мы заботимся о Вас. И мы знаем, как непросто проходить через протокол ЭКО.
Все те пять дней, которые требуются эмбриону для полноценного развития, Вам хочется знать, что с ним происходит. Мы написали эту статью, чтобы объяснить вам суть этого сложного этапа.
В эмбриологической лаборатории нашей Клиники созданы идеальные условия для культивирования и хранения эмбрионов. Доверьтесь своему врачу и эмбриологам, они помогут вам найти оптимальный вариант.
Помните, что над вашим протоколом ЭКО трудится не только врач, а вся команда Клиники Нуриевых, которая каждый день думает над тем, как сделать ваше лечение комфортным и эффективным. Постарайтесь провести эти дни в приятных эмоциях и просто отдохнуть. Тогда, все вместе, мы обязательно добьемся успеха.

Источник